LonEZTM長片段高保真聚合酶

For PCR Enzyme: 5u/μl Cat.: E3055

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LonEZTM長片段高保真聚合酶是南京德泰生物新推出的專為長片段PCR設計的高保真聚合酶。該酶是將單鏈DNA結合蛋白和聚合酶活性片段巧妙地融合在一起,通過重組表達獲得。可輕松實現對35kb目標片段的精準擴增。LonEZ 不僅有很好的長片段擴增能力,還有大于Pfu的高保真性,是基因組長片段PCR及相關實驗的推薦用酶。

活性

以倉鼠卵巢細胞DNA作為模板/引物,在72℃,在30分鐘攝入10nmol dNTP的活性定義為1個活性單位(U)。

產品優勢

  1. 長片段擴增:以λDNA為模板,輕松實現35kb基因擴增
  2. 高保真:通過擴增LacZ基因,藍白斑驗證,保真度為Pfu 1.6倍
  3. 速度快:5kb目的片段擴增,延伸只需25秒

應用

常規PCR
長片段PCR
cDNA克隆

制品內容

LonEZTM高保真聚合酶
10×buffer(Mg2+)
5×buffer(Mg2+)
5×df buffer
dNTP mixture 10mM each
ddH2O PCR grade

模板加入量說明

人類基因組DNA 0.1~1μg
大腸桿菌基因組DNA 10ng~100ng
λDNA 0.5~10ng
質粒DNA 0.1-10ng

PCR反應體系

試劑 體積 最終濃度
10×Buffer(Mg2+) 5μl
dNTP 10mM each 4μl 0.8mM each
primer 1 1μl 0.5uM
primer 2 1μl 0.5uM
Template 0.1ng-0.5ug
LonEZTM(5U/ul) 1μl 0.1U/ul
ddH2O PCR grade Up to 50μl

注:冰上配置PCR反應體系, DNA聚合酶最后加入到PCR體系中

PCR反應條件

步驟 溫度 時間 循環數
預變性 95℃ 3min 1
變性 95℃ 30s 25~30
退火 60℃ 30s
延伸 72℃ 10min
終延伸 72℃ 15min 1

案例介紹

LonEZ長片段擴增酶以λDNA為模板,PCR擴增1.2kb-30kb目標片段,有很好的擴增效果

以λDNA為模板,PCR擴增1.2kb-30kb目標片段,有很好的擴增效果

高保真聚合酶以人類基因組DNA為模板擴增

M: λHand III marker????1: 5U的普通Taq酶
2,3,4: 1U,2U,5U的LonEZ????5: 5U的KOD
6,7,8: 1U,2U,3U的LonEZ

超保真聚合酶以小鼠動力蛋白全長cDNA為模板擴增1K 2K 3K 4K 8K的PCR片段

模板:人類基因組
目的片段:15kb
1:普通Taq酶
2:LA-PCR Kit(Brand T)
3:LonEZ
DNA Marker:10k to 5k

高保真酶以人類基因組為模板擴增Vinculin 基因片段

模板:λDNA
目的片段:35kb
1,2:LonEZ
DNA Marker:10k to 0.5k

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