內毒素去除及檢測服務

德泰內毒素去除及檢測服務是原核蛋白表達純化服務的一項重要服務項目。內毒素廣泛存在于革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌E.coli)細胞壁中。大腸桿菌在表達重組蛋白過程中,會產生大量內毒素。內毒素作為一種熱源,會導致生物體發生炎癥發熱反應,所以當重組蛋白應用于某些動物實驗時,需要進行內毒素去除,以免導致動物產生不良反應,進而影響實驗結果。

重組蛋白的應用 高內毒素 低內毒素
體外酶活實驗 無影響 無影響
蛋白抗原,制備抗體 無影響 無影響
體外細胞分化培養 會有影響 要求低內毒素 < 1EU/ug
小鼠藥效評價 影響大 要求低內毒素 < 0.1EU/ug
其他動物體內實驗 有影響 要求低內毒素

內毒素去除的一般過程

內毒素控制和去除,是基于內毒素結合肽純化樹脂的原理,需要從蛋白制備實驗的開始就進行控制,實驗中所有用到的器皿,儀器,水,試劑,移液器吸管,都做內毒素去除。同時,實驗在潔凈間中完成,確保很低的內毒素水平。

重組蛋白制備過程的內毒素控制及去除

內毒素定量檢測方法

內毒素的檢測方法包括半定量的凝膠法檢測和絕對定量的顯色法。基于鱟試劑的顯色法和凝膠法,是目前國際上最精準的檢測方法,很多制藥巨頭如默克,Lonza,都在優先使用該方法。

內毒素小知識

什么是內毒素

內毒素(endotoxin)是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分,叫做脂多糖(LPS)。脂多糖對宿主是有毒性的。內毒素只有當細菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細胞后才釋放出來,所以叫做內毒素。 其毒性成分主要為類脂質A。各種細菌的內毒素大致相同,可引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及播散性血管內凝血等。內毒素耐熱而穩定,160℃ 2-4小時才可被破壞。一般環境中,如空氣中微塵,普通水,未處理儀器和器皿,都有內毒素。涉及細胞和動物實驗時,一般對內毒素控制都有要求。

內毒素單位的來由

內毒素的一般水平及用藥標準

內毒素的一般水平及用藥標準

內毒素的一般水平及用藥標準

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