Taq DNA聚合酶選購指南

隨著分子生物學的不斷發展,PCR技術已被運用到多種領域,而影響PCR實驗成敗的因素有很多,其中Taq DNA聚合酶的選擇是一關鍵因素。目前已經市場化的Taq酶有多種:普通Taq酶,熱啟動Taq酶,高保真聚合酶,長片段擴增酶,因其各自的適用性不同,不當的選擇往往會使實驗失敗。本文根據客戶考慮的常用指標如特異性、保真性、擴增片段長度,我們對這幾種酶進行歸類,其性質用途便一目了然,從而幫助我們更好的選擇。

對比表格

指標 普通Taq酶 熱啟動Taq酶 高保真聚合酶 長片段高保真酶
通用標準 錯配率 錯配率 錯配率 錯配率
錯配率(相對) 2×10-4 -10-5 10-6 10-7 10-7
校正功能
熱啟動
目標片段長度 <6kb(簡單模板) <10kb(簡單模板) <20kb(簡單模板)
<15kb (復雜模板)
<35kb(簡單模板)
<18kb (復雜模板)
延伸時間(推薦) 2kb/min 1.5kb/min 1.5-2kb/min 1.5-2kb/min
優勢 擴增速度快 高特異性
高靈敏度
高效率擴增
保真度為pfu的2倍
速度快,5kb延伸只需25s
適用于粗提取樣品擴增
專門針對10-35kb的模板進行擴增
具有高保真性
缺點 擴增特異性差,非特異性產物較多 擴增無保真性 無熱啟動的功能,操作要在低溫下進行 無熱啟動的功能,操作要在低溫下進行
應用 常規PCR 常規PCR
熒光定量PCR
DNA測序
TA克隆
應用于保真性要求高的方面:基因篩選、分子診斷、克隆表達、突變檢測 能夠35kb的目標片段,其他酶無此擴增功能,且具備保真性

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